Поведение времен удерживания гидрофобных компонентов
Сравнение разделения двух серий гомологов углеводородов [C
6H
5-(CH
2)
n-CH
3]
и [C
6H
5-n-(CH3)
n]
колонке обращенной фазой на базе силикагеля и колонке наполненной фазой
Hypercarb, показывает, как
Hypercarb
разрешает соединения с дополнительной метиленовой или метиловой группой
(
см. иллюстрацию),
в то время как обычная обращенная фаза не спсобна их разделить. Хотя два типа
замещений обладают близкими гидрофобными свойствами, на
Hypercarb достигается их разделение благодаря
различиям в "соотвествии" молекул углеродной поверхности. Чем больше молекула "подходит" углеродной поверхности,
тем больше ее время удерживания. При метиленовом замещении алкильный скелет удлиняется на CH
2 группу
каждый раз, что приводит к возникновению позиционного заряда на алкильном скелете.
Такие позиционные вариации не случаются при метиловом замещении. При добавлении метиловых групп позиция скелета
остается неизменной, разрешая только один механизм взаимодействия молекулы с углеродной поверхностью
через последовательность добавления. Это изменение позиционирования и последующее изменение "подходимости"
к поверхности, что и определяет возможность разделения.
Поведение времен удерживания полярных компонентов
В обращенно-фазной хроматографии удерживание определяется гидрофобностью анализируемого соединения, и, следовательно,
большие времена удерживания наблюдаются при увеличении гидрофобности соединений вследствие более сильного
взаимодействия между анализируемым соединением и алкильными хвостами стационарной фазы.
Обращенные фазы демонстрируют обратную тенденцию при увеличении полярности соединений, более короткие времена удерживания
наблюдаются для более полярных компонентов вследствие того, что взаимодействие между анализируемыми соединениями
и стационарной фазой перекрывается взаимодействием анализируемого соединения с мобильной фазой.
Прямо противоположный эффект наблюдается для материала
Hypercarb, чем более полярно анализируемое соединение,
тем больше его время удерживания.
Этот эффект описывается как "эффект удерживания полярных соединений на графите". Этот эффект приводит к
особой эффективности
Hypercarb для разделения высокополярных соединений
(
пример).
Hypercarb показывает уникальные
результаты при использовании для анализа ионизуемых или ионизованных соединений, углеводов или
соединений содержащих OH, COOH или NH группы (
см. иллюстрацию)
Увеличение селективности для соединений с родственными структурами
Сочетание "эффекта полярного удерживания" и дефференциации соединенией в соотвествии с их сочетаемостью с
углеродной поверхностью делает
Hypercarb идеальной фазой для анализа соединений с близкой структурой.
Это демонстрируется разделением диастереоизомеров антибиотика Axetil
(
см. иллюстрацию).
D2 изомеры соответсвуют четко выделенным пикам на хроматограмме, что позволяет вычислить соотношение
D2 изомеров. Разделение D2 изомеров не представляется возможным на обращенной фазе, однако, на
Hypercarb могут быть разделены все изомеры, причем с великолепным разрешением.